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怎样消化细胞培养瓶上的细胞
发表日期:2024-04-06

细胞培养瓶多用于贴壁细胞的培养,不同于悬浮细胞在培养基中生长,贴壁细胞需要贴附在容器的表面生长,所以进行收获或者传代的时候要先将细胞消化下来。消化细胞的方法有多种,常见的主要是以下几种:

1、酶消化法

这也是我们日常中使用比较多的一种方法,一般使用胰酶消化,浓度在0.25%-0.5%之间,消化时间根据细胞种类、操作手法、温度等因素而不同。消化完之后,需要用血清或者含血清的培养基终止消化。

2、物理法
不借助胰酶,直接吹打或用细胞刮刀将细胞培养瓶表面的细胞消化下来,对于贴壁很牢的细胞可以使用这种方法。但要注意,吹打和刮刀都会给细胞造成一定的损伤,一般不建议使用这种方法。

怎样消化细胞培养瓶上的细胞_v8娱乐细胞

3、冷冻法

利用细胞冷冻后收缩的原理,让细胞在从培养瓶上脱落。这种方法对细胞的损伤小,适用于贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。如间充质干细胞、DC细胞等。

4、离子螯合剂

不破坏细胞表面分子,仅与CAMs螯合。一般使用EDTA比较多,浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显着影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。

以上就是消化细胞培养瓶中细胞常用的几种方法,综合来看,酶消化法是应用较多的一种。当然也要根据细胞的种类及特性,选择合适的消化方法。

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