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细胞工厂内细胞不贴壁该怎么办
发表日期:2024-02-16

细胞工厂是近几十年逐步出现在国内科研室和疫苗生产厂家的视线中,细胞培养已广泛应用于医学的各个领域,通过体外培养,可以获得单一种类的细胞,今天根据细胞工厂厂家来跟大家分享一下使用细胞工厂来培养细胞时内部细胞不贴壁该怎么办

细胞的传代最重要的是胰酶处理时间:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。

解决办法:缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。

解决办法:更换血清。

细胞工厂内细胞不贴壁该怎么办_v8娱乐细胞

支原体或细菌的污染。

解决办法:分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如v8娱乐支原体污染,丢弃培养物。

培养液配置、储存不当,如 pH 值过碱,Gln 量太少等原因。

解决办法:使用无菌醋酸溶液调整 pH 值或充入无菌 CO2。

复苏的细胞本身状态不好,已经老化,失去贴附性。

解决办法:启用新的保种细胞。

如果细胞比较珍贵或没有备份细胞

解决办法:可尝试将不贴壁细胞收集离心,再用 PBS 将沉淀清洗一遍,离心后的沉淀加入胰酶重新消化接种,同时提高血清浓度到 15%~20%。

这就是细胞工厂内细胞不贴壁的原因了,希望对大家有所帮助。

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